|
- 2020
Razvoj u?inkovitog i reproducibilnog postupka dobivanja pet stabilnih kultivara krumpira geneti?ka transformacijom s pomo?u bakterije Agrobacterium tumefaciensDOI: 10.17113/ftb.58.01.20.6187 Keywords: geneti?ka transformacija krumpira, genotipovi, regulatori rasta biljaka, isplativ protokol Abstract: Sa?etak Napredak metoda transformacije biljnih stanica omogu?io je znanstvenicima da ugradnjom gena, indukcijom mutacije ili supstitucijom baza razviju biljke sa ?eljenim svojstvima, i to skoro bez ograni?enja. Pritom su genotip i tip eksplatanta va?ni faktori koji utje?u na u?inkovitost transformacije krumpira. U ovom je radu razvijen brz i reproducibilan postupak transformacije s pomo?u bakterije Agrobacterium tumefaciens za dobivanje stabilnih kultivara krumpira, i to kombinacijom razli?itih regulatora rasta. Eksplantati lista i internodija pet kultivara krumpira, i to: Lady Olympia, Granola, Agria, Désirée i Innovator inficirani su sojem bakterije Agrobacterium tumefaciens LBA4404, koji sadr?ava vektor pBIN19 ?to nosi gen za β-glukuronidazu gusA, ?ija je ekspresija pod kontrolom promotora 35S CaMV. Metodom PCR potvr?ena je prisutnost gena gusA i nptII u regeneriranim biljkama. Molekularna analiza potomstva pokazala je da su oba gena uspje?no ugra?ena i eksprimirana. Rezultati pokazuju da je kultivar Lady Olympia najprikladniji za uporabu u daljnjim postupcima geneti?ke transformacije krumpira. Sveukupno gledano, jednostavnost, brzina i reproducibilnost postupka omogu?uju njegovu ?iroku primjenu pri uzgoju transgenih kultivara krumpira
|