|
- 2017
Analiza izra?aja gena tijekom in vitro diferencijacije neuronaKeywords: ?iv?ane mati?ne stanice, neuroni, RT-PCR, izra?aj gena, imunocitokemija Abstract: Sa?etak Analiza izra?aja gena napravljena je tijekom in vitro diferencijacije ?iv?anih mati?nih stanica 0., 1., 3., 5. i 7. dan diferencijacije. U ovom je istra?ivanju napravljena analiza izra?aja gena karakteristi?nih za ?iv?ane mati?ne stanice (Nestin), neurone (MAP2), astrocite (GFAP) te za dva sinapti?ka biljega (Neuroligin 1 i Synapsin 1) pomo?u RT-PCR-a. Rezultati RT-PCR-a uspore?eni su s rezultatima imunocitokemije. Razina izra?aja Nestina najve?a je tijekom nultog dana diferencijacije i nakon toga smanjuje se tijekom diferencijacije stanica. No, dio stanica ostaje u nediferenciranom obliku i ?ini 2,5 % po?etne razine Nestina. Stanice MAP2 izra?avaju ve? nulti dan diferencijacije na razini 16,6 % od maksimalnog izra?aja koji se pojavljuje sedmi dan diferencijacije. Izra?aj GFAP-a pojavljuje se tre?i dan diferencijacije i postupno raste do sedmoga dana. Imunocitokemijski, GFAP-pozitivne stanice vidljive su tek peti dan u 1 % prebrojenih stanica. Oba sinapti?ka biljega pozitivna su ve? nulti dan diferencijacije i razina njihova izra?aja postupno se pove?ava za 70 % od po?etne vrijednosti, pri ?emu je razina Neuroligina 1 ja?a u odnosu na Synapsin 1
|