Razvoj SPE-HPLC-DAD metode za odre？ivanje florfenikola i florfenikol amina u cerebrospinalnoj teku？ini svinja

Sa？etak Raspodjela florfenikola (FF) i njegovog metabolita florfenikol amina (FFA) u cerebrospinalnoj teku？ini svinja istra？ena je nakon dvokratne primjene u mi？i？ s 48-satnim razmakom originalnog i generi？kog veterinarsko-medicinskog proizvoda (VMP) iste terapijske doze (20 mg FF/kg tjelesne mase) u istim uvjetima pokusa. Oba VMP-a imaju odobrenje za stavljanje u promet u Hrvatskoj te su po farmaceutskom obliku otopine za injekcije i sadr？avaju 300 mg FF/mL. Pokus je proveden na klini？ki zdravim svinjama raspore？enim u dvije pokusne i jednu kontrolnu skupinu. Prvoj pokusnoj skupini ？ivotinja primijenjen je originalni, drugoj skupini generi？ki lijek, dok je tre？a skupina bila kontrolna. ？rtvovanje ？ivotinja uslijedilo je nakon 216, 288 i 384 sata od prvog davanja VMP-a. Uzorci cerebrospinalne teku？ine prikupljeni su u trenutku ？rtvovanja i analizirani su optimiranom i validiranom teku？inskokromatografskom metodom uz detekciju UV-detektorom s nizom fotodioda (HPLC-DAD). Obrada uzoraka cerebrospinalne teku？ine provedena je ekstrakcijom na ？vrstoj fazi C18 (SPE). Primjenom SPE-HPLC- DAD metode ustvr？eno je da matrica ne utje？e na linearnost FF i FFA u radnom podru？ju od 0,05 do 5,00 μg/mL te je postignuta granica detekcije od 0,0023 μg/mL za FF i od 0,0100 μg/mL za FFA. Vrijednosti analiti？kih povrata kre？u se od 86,6 % do 111,8 % za FF, odnosno od 91,7% do 98,8% za FFA. U ovom radu je dokazano da je SPE-HPLC-DAD metoda selektivna, osjetljiva i pouzdana analiti？ka metoda za odre？ivanje FF i FFA u cerebrospi- nalnoj teku？ini. S obzirom na rezultate na？eg preliminarnog istra？ivanja FF u plazmi svinja tretiranih originalnim, odnosno generi？kim VMP-om, cilj ovog istra？ivanja bila je i usporedba distribucije FF u uzorcima plazme i cerebrospinalne teku？ine svinja nakon 216. sata od primjene VMP-a. Me？utim, u uzorcima cerebrospinalne teku？ine svinja ？rtvovanih u navedenom pokusnom razdoblju nisu detektirani ni FF ni FFA. Zbog sli？nosti matrica, SPE-HPLC-DAD metoda mogla bi poslu？iti u budu？im farmakokineti？kim studijama FF u uzorcima plazme i seruma dobivenim od svi- nja nakon primjene u mi？i？