Optimizacija metode plinske kromatografije-spektrometrije masa za istovremeno odre？ivanje tetrahidrokanabinola i njegovih metabolita u urinu ？takora

Sa？etak S ciljem procjene u？inka irinotekana (IRI) na eliminaciju delta-9-tetrahidrokanabinola (THC) mokra？om u eksperimentalnom modelu ？takora, razvili smo analiti？ku metodu za odre？ivanje masene koncentracije THC-a i njegovih metabolite [11-hidroksi-delta-9-tetrahidrokanabinola (THC-OH) i 11-nor-9-karboksi-delta-9-tetrahidrokanabinola (THC-COOH)] u mokra？i ？takora tretiranih samo THC-om i tretiranih istodobno s THC-om i IRI-jem. U tu svrhu optimizirani su uvjeti hidrolize i ekstrakcije na ？vrstom nosa？u za ispitivane analite i razvijena je metoda plinske kromatografije-spektrometrije masa (GC-MS) kako bi se kvantificirala sva tri analita u mokra？i ？takora. Naju？inkovitija metoda hidrolize za konjugate THC, THC-OH i THC-COOH bila je tandemska hidroliza enzimom β-glukuronidazom iz Escherichia coli na 50 ° C u trajanju od 2 sata koju je slijedila alkalna hidroliza. Predlo？ena metoda je primijenjena za odre？ivanje masene koncentracije analita u 24-satnom urinu ？takora. THC nije detektiran ni u jednom uzorku, THC-OH je kvantificiran u 50 % uzoraka, a THC-COOH u svim uzorcima. Uo？eno je pove？ano izlu？ivanje THC-COOH u mokra？i ？takora koji su tretirani kombinacijom THC-a i IRI-ja u usporedbi sa ？takorima tretiranim samo THC-om. Opisana metoda bila je pogodna za odre？ivanje masene koncentracije metabolita THC-a u mokra？i ？takora zbog njene osjetljivosti (granice detekcije: 0,8-1,0 μg/L), to？nosti (> 96%) i preciznosti (RSD <6%)