Runx2在白藜芦醇诱导的小鼠BMSCs中的表达及生物信息学分析

为探讨成骨分化的主要调节因子Runt相关转录因子2（Runt-related transcription factor 2, Runx2）在白藜芦醇（resveratrol，RSVL）诱导小鼠骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cell，BMSCs）向成骨细胞分化中的作用，以及以Runx2为研究起点，通过生物信息学分析方法以表明白藜芦醇诱导BMSCs向成骨分化的可能机制。本研究用不同浓度的RSVL（10-9 mol/L /10-7 mol/L）作用小鼠骨髓间充质干细胞 8 d。实时逆转录-聚合酶链反应及Western印记法检测Runx2的mRNA和蛋白质表达水平。生物信息学方法分析及预测鼠Runx2蛋白的性质及特征。结果表明，与对照组相比，10-9 mol/L、10-8 mol/L、10-7 mol/L 白藜芦醇诱导Runx2的mRNA表达水平分别增加6%（P> 0.05）、30%（P< 0.01）、49%（P< 0.01）；与对照组相比，10-9 mol/L、10-8 mol/L、10-7 mol/L 白藜芦醇诱导Runx2蛋白表达水平分别增加12%（P> 0.05）、72%（P< 0.01）、94%（P< 0.01）。由此可见，白藜芦醇可显著上调BMSCs中Runx2的mRNA和蛋白质表达水平(P< 0.01)，且10-7 mol/L的白藜芦醇诱导作用最强。生物信息学预测得知，Runx2属于碱性不稳定蛋白质；二级结构中无规卷曲占主导；存在102个潜在的磷酸化位点、97个潜在O-糖基化位点和8个N-糖基化位点；Runx2具有利于蛋白质间相互作用的结构特点；P1启动子区潜在的转录因子结合位点共28处。疏松的结构特征、丰富的修饰位点及多种转录因子结合位点为探讨白藜芦醇诱导BMSCs的分子机制提供参考