农杆菌介导的浸花法转化甘蓝型油菜过程中 柱头顶端开裂时期的确定

农杆菌介导的浸花法(floral-dip)是一种简便、快速、高效、重复性好、稳定性高的非组织培养的遗传转化法，在拟南芥中已得到了广泛的应用，但由于诸多因素的影响，其在油菜中的转化效率受到了很大的制约。以甘蓝型油菜为研究对象，通过对雌蕊柱头开裂时间的研究，发现即将开放的10~15个花苞的柱头是裂开的，此时最有利于农杆菌进入子房室完成转化。对这部分花蕾进行浸花法转化，得到的T1代种子发芽后通过除草剂筛选获得抗性转基因植株，进一步对这些植株进行PCR验证，其阳性率高达72.7%。该研究能进一步提高农杆菌转化效率，实现甘蓝型油菜更有效的遗传转化