ER-α-ERK5信号通路介导流体剪切力促进MC3T3-E1细胞增殖

目的：研究雌激素受体α（ER-α）在流体剪切力促进细胞外信号调节激酶5（ERK5）活化以及ER-α-ERK5 信号通路 在成骨细胞增殖中的具体分子机制。方法：给予成骨MC3T3-E1 细胞孵育特异性ER-α抑制剂MPP（methyl-piperidinopyrazole， 1 μmol/L），孵育高选择性ERK5 活性抑制剂XMD8-92（5 μmol/L），和/或加载12 dyn/cm2流体剪切力处理。采用 MTT实验检测成骨细胞的增殖活性，采用蛋白免疫印记实验检测ER-α、P-ERK5、ERK5、Cyclin D1（细胞周期蛋白）和 CDK4（细胞周期蛋白依赖性激酶）蛋白的表达水平。结果：生理强度（12 dyn/cm2）的流体剪切力作用于成骨MC3T3-E1 细胞60 min 后能显著促进成骨细胞增殖，促进Cyclin D1 和CDK4 的表达；同时ER-α和P-ERK5 的表达显著增加。成骨 细胞孵育MPP抑制ER-α后，P-ERK5 的表达显著下降，Cyclin D1 和CDK4 表达也显著降低。孵育XMD8-92 抑制ERK5 活性后，流体剪切力促进成骨细胞中Cyclin D1 和CDK4 表达水平显著下降。结论：流体剪切力通过ER-α-ERK5 信号通 路上调Cyclin D1和CDK4 的表达水平，最终导致成骨MC3T3-E1 细胞增殖