TRPM4通道抑制剂9-菲酚在骨关节炎软骨细胞中的作用

摘要 目的 研究TRPM4信号通道抑制剂-9-菲酚对骨关节炎（OA）软骨细胞的肥大分化及软骨组织的降解的作用，并研究9-菲酚对OA软骨细胞凋亡的影响，从而为治疗OA提供实验依据。 方法 选取因OA进行膝关节置换而截下的胫骨平台关节软骨，消化成软骨细胞进行细胞培养。软骨细胞均分为6组，一组不加药作为对照组，其余分别加入不同量的。9-菲酚干预1 d培养后细胞分别进行RT-qPCR，检测Runx-2、MMP-13（软骨细胞肥大指标）及COL II、Aggrecan（软骨代谢指标）；采用TUNEL染色荧光显微镜检测及Annexin V和7-AAD标记流式细胞仪检测9-菲酚干预1 d后OA软骨细胞凋亡情况。 结果 RT-qPCR显示：无法判断9-菲酚对软骨细胞代谢的影响；而软骨细胞肥大指标Runx-2、MMP13的mRNA较对照组表达水平有升高趋势，可见在mRNA水平上，9-菲酚可能促进软骨细胞肥大。TUNEL染色荧光显微镜检测软骨细胞凋亡率发现，9-菲酚浓度为2×10-5 mol/L组较对照组凋亡率明显下降（P<0.05），其他浓度组与对照组比较均无统计学差异，但均有凋亡率下降的趋势。Annexin V和7-AAD标记流式细胞仪检测软骨细胞凋亡率发现，9-菲酚浓度为1×10-5 mol/L、2×10-5 mol/L、4×10-5 mol/L时较对照组凋亡率均有所下降（P<0.05），而在另外两组有下降趋势。 结论 9-菲酚在细胞水平上对OA软骨细胞的肥大分化有促进作用，可能促进OA的进展。同时9-菲酚可以抑制OA软骨细胞的凋亡，在OA治疗方面可能具有积极意义