类风湿关节炎患者血清神经轴突导向分子Semaphorin 5A表达及其对破骨细胞分化的影响

摘要 目的 研究类风湿关节炎（RA）患者血清神经轴突导向分子Semaphorin 5A（Sema 5A）表达及其对小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞向破骨细胞分化的作用。 方法 （1）选RA患者62例，骨关节炎（OA）患者30例，健康对照者48例，应用酶联免疫吸附（ELISA）法检测所有受试者血清Sema 5A水平。（2）以不同浓度Sema 5A（0、0.5、1、2.5、5 μg/ml）处理小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞，培养7 d后行抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色，采用实时定量聚合酶链反应（PCR）检测TRAP、组织蛋白酶-K、基质金属蛋白酶-9 mRNA表达水平；（3）以5 μg/ml Sema 5A处理小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞7 d，培养基中预先加入薄骨片，显微镜下观察骨吸收陷窝个数。 结果 （1）RA患者血清Sema 5A水平显著高于健康对照者和OA患者[（5.24±0.59）μg/L比（2.93±0.34）μg/L比（2.68±0.47）μg/L，P<0.05）]；抗环瓜氨酸多肽（CCP）抗体阳性RA患者血清Sema 5A水平显著高于抗CCP抗体阴性者（P< 0.05）。Sema 5A水平与RA患者以C反应蛋白计算的28个关节疾病活动度（DAS28-CRP）、C反应蛋白、临床疾病活动指数（CDAI）、Sharp评分呈正相关（r值分别为0.273、0.519、0.448、0.292，P<0.05）；（2）随着Sema 5A浓度增加，TRAP染色阳性细胞数逐渐增多，5 μg/ml Sema 5A作用最强。Sema 5A能诱导TRAP、组织蛋白酶-K、基质金属蛋白酶-9 mRNA表达上调；（3）与空白比，5 μg/ml Sema 5A骨吸收陷窝数增多。 结论 RA患者血清Sema 5A水平显著升高，与患者的疾病活动度及骨破坏程度相关。Sema 5A可直接诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞向破骨细胞分化