应用实时荧光聚合酶链反应检测婴幼儿腹泻标本中的腺病毒

建立实时荧光聚合酶链反应(Real-timePCR)方法检测腺病毒，并分析浙江省温州地区散发性婴幼儿腹泻患者不同型别腺病毒的感染情况。方法根据GenBank中腺病毒六邻体基因序列设计一对通用引物，建立Real-timePCR方法检测婴幼儿腹泻标本中腺病毒DNA，并与免疫层析法比较；同时对Real-timePCR方法检测阳性的标本进行PCR产物测序和病毒分离培养及酶切鉴定。结果建立快速、特异检测婴幼儿腹泻标本中腺病毒DNA的Real-timePCR技术。157份婴幼儿腹泻标本中免疫层析法检测阳性3份，阳性率为1.91%；Real-timePCR检测阳性5份，阳性琦率为3.18%(5/157)；154份免疫层析法检测阴性标本中，有2份Real-timePCR法检测为阳性。5份Real-timePCR检测阳性标本经测序鉴定，Ad3型占1.91%(3/157)，Ad7型占1.27%(2/157)；经病毒分离培养检出阳性2例，酶切鉴定为Ad3型。结论Real-rimePCR技术结合PCR产物直接测序分析具有敏感、特异等优点，适用于腹泻标本中腺病毒的检测及分型。2008年2-4月浙江省温州地区散发性婴幼儿腹泻的腺病毒主要为Ad3型和Ad7型