异烟肼诱导致单耐异烟肼结核分枝杆菌假定药物外排泵基因表达量变化的初步研究

目的 <\b>检测单耐异烟肼结核分枝杆菌经异烟肼诱导培养前后假定药物外排泵基因表达量的变化,探讨可能导致结核分枝杆菌对异烟胼耐药的外排泵基因及导致基因高表达的原冈.方法 <\b>选取35株单耐异烟肼结核分枝杆菌临床分离株、10株全敏结核分枝杆菌临床分离株和H37Rv(标准对照),对各菌株进行无异烟肼和亚抑菌异烟肼浓度(1/4 MIC)的7H9液体培养基诱导培养,提取RNA后反转录并采用real-time PCR技术分别检测27个假定外排泵基因表达量的变化,用公式2-ΔΔCT计算每个假定基因相对表达量的差异倍数.结果 <\b>耐药株中27个假定外排泵基因有13个基因高表达,高表达Rv1258c基因的菌株数最多为6株,其次是高表达Rv2265和Rv0849的菌株各有5株.35株菌中14株菌(40.00％)有高表达的外排泵基因,6株(17.14％)菌株均只有1个假定外排泵基因高表达；8株(22.86％)菌株有两种及以上基因高表达,其中4、2、1、l株菌株分别有2、4、5、7个基因高表达；10株全敏菌株和H37Rv 27个假定外排泵基因均无高表达.结论 <\b>Rv1258e、Rv2265和Rv0849等基因可能是导致结核分枝杆菌对异烟肼耐药的外排泵基因,异烟肼可能为结核分枝杆菌部分假定外排泵基因的诱导物而导致其激活并高表达