长春地区乙型肝炎病毒基因分型与肝病发病关系的研究

目的了解长春地区乙型肝炎(乙肝)患者基因型特点及与肝炎严重程度、疾病转归的关系，以指导临床对疾病进展的判断和指导临床用药。方法选择216例乙肝病毒(HBV)阳性肝炎患者，年龄33-87岁，平均(60.5±11.4)岁。病变程度的判断根据2000年《病毒性肝炎防治方案》中的诊断标准。应用巢式聚合酶链反应方法(nPCR)扩增HBV S基因组序列，用第二轮PCR产物直接进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析；然后用HBV S基因扩增产物采用Sanger双脱氧链终止法进行DNA测序，将所得到的核苷酸序列及推测的相应氨基酸序列通过DNASIS软件处理，并与GenBank中已发表的HBV中国株及国外株进行同源性比较以确定HBV的基因型，证明用S基因序列的RFLP法HBV分型结果与用全基因组序列的基因分析是一致的。表明S基因序列RFLP法的基因分型结果与S基因测序分型结果是一致的。结果216例HBV DNA阳性标本中单基因型分别检测出A、B、C、D四种，其中单基因型中A型有1例(0.46％)，B型有19例(8.8％)，C型有175例(81.02％)，D型有21例(9.72％)。86例HBV DNA阳性住院患者标本中，C型为感染的主要基因型，69例(80.23％)。B型次之，9例(10.47％)。6例原发性肝癌均为C型;20例肝炎后肝硬化的患者中有17例(85.0％)为C型。结论长春地区HBV基因型仍以C型为主(81.02％)，B、D型次之(分别是8.8％和9.72％)。同时结果显示长春地区HBV感染有基因多样性趋势，表现在检测出了A单基因型。肝癌、肝硬化与C基因型HBV的相关性最大。C基因型HBV DNA拷贝数较非C基因型高，提示与HBV DNA在C型患者体内长期存在有关。HBV病毒载量与肝脏病变严重程度的关系无统计学意义