尖锐湿疣患者血清及宫颈分泌物HPV 6bE7抗体检测方法的建立及流行病学意义

目的建立尖锐湿疣(cA)患者血清和宫颈分泌物人乳头瘤病毒(HPV)6b型E7特异性抗体检测方法。方法利用PCR扩增HPV 6bE7全长基因，构建重组原核表达质粒pET32a(+)/HPV 6bE7。原核表达产物采用SDS.PAGE和Westernblot进行鉴定。进一步经镍螯合亲和层析法(Ni-NTAAgarose)纯化后作为包被抗原，以间接ELISA方法分别对56例CA患者、81名健康对照者的血清和宫颈分泌物标本中的特异性抗体进行检测，另取43例宫颈癌患者的血清标本作为对照；同时用PCR方法对56例CA组织标本进行HPV6bDNA的检测。结果从CA组织标本中扩增的HPV 6b E7全长基因与标准序列(GenBank登录号:NC001355)同源性为99.5％。HPV 6b E7融合蛋白在原核表达系统中得到了较高效的表达(40 I.tg/m1)。经间接ELISA检测，CA组血清特异性IgG抗体水平明显高于宫颈癌组和健康对照组(P 结论CA患者血清和宫颈分泌物HPV 6b E7特异性抗体，用于诊断HPV 6b感染具有一定的敏感性和较高的特异性，可用于HPV 6b感染的流行病学调查