猪链球菌脉冲场凝胶电泳分析方法的建立

目的 建立一种可共享的猪链球菌脉冲场凝胶电泳分析（PFGE）方法。方法 利用PulseNet技术优化猪链球菌PFGE分子分型方法，提出新的分析方案，包括胶块的制备、内切酶的选择、电泳条件等。利用DNAStar的Mapdraw软件对猪链球菌基因组序列进行分析，发现在242种内切酶中，Swa Ⅰ、Sma Ⅰ、Apa Ⅰ种酶比较适合。结果 通过对34个血清型共100株菌的分析，发现使用Swa Ⅰ可获得59种带型，使用Sma Ⅰ可获得53种带型，使用Apa Ⅰ可获得43种带型。其中以Swa Ⅰ的分辨率最好。结论 提出猪链球菌的Swa Ⅰ PFGE分析方法，并对条件进行优化，较原方法所需时间短、图像清晰，更具有可重复性，基本具备推广的条件