问号钩端螺旋体属特异性LipL41s抗原膜定位及其患者血清抗体检测

目的 确定问号钩端螺旋体(钩体)属特异性脂蛋白抗原LipL41s膜定位及其自然抗体应答情况和抗体类型.方法 采用显微镜凝集试验(MAT)检测四川地区钩体病患者血清标本.IPTG诱导重组原核系统表达目的蛋白rLipL41/1和rLipL41/2,Ni-NTA亲和层析法提纯目的重组表达产物.采用Western blot检测感染不同血清群问号钩体病患者血清与rLipL41s的免疫反应性.采用胶体金免疫电镜技术,对LipL41s进行膜定位.建立基于rLipL41s的ELISA,检测钩体病患者血清中特异性抗体水平及其类型.结果 黄疸出血群是四川地区最主要的优势钩体血清群.不同血清群问号钩体病患者血清均能有效识别LipL41s.LipL41s是位于钩体外膜表面的蛋白分子.156例MAT阳性钩体病患者血清标本中,rLipL41/1和rLipL41/2特异性IgM阳性率分别为84.6%～87.8%和78.2%～83.3%,特异性IgG阳性率分别为69.2%～81.4%和75.0%～80.1%.结论 LipL41s是钩体表面蛋白抗原.自然感染钩体时,LipL41/1和LipL41/2可诱导机体产生IgM和IgG两类血清抗体,且两者之间有广泛的抗原交叉反应.rLipL41/1和rLipL41/2可作为研制通用型钩体基因工程疫苗和检测试剂盒的候选抗原