1961–2010年中国O1群El Tor型霍乱弧菌产毒株ctxB和rstR基因变迁

目的 分析1961–2010年中国不同地区分离的O1群El Tor型霍乱弧菌产毒株的 ctxB 变异特征和 rstR 基因类型。 方法 选取中国1961–2010年间分离的O1群霍乱弧菌菌株作为研究对象，共385株。应用PCR方法扩增 ctxB 基因并进行序列测定和分析；使用 rstR 型特异性引物扩增 rstR 基因，确定其基因型别。 结果 ctxB 基因序列分析表明，385株被检菌株中52.5%(202/385)携带 ctxB ET，47.5%(183/385)携带 ctxB class，即第39位的酪氨酸(Y)变为组氨酸(H)，68位的异亮氨酸(I)变为苏氨酸(T)，呈现古典生物型菌株(O395)的序列特征。1961–1992年以携带 ctxB ET的菌株占绝对优势，比例高达98.4%(182/185)；1993年后，携带 ctxB class的菌株增加，其中1993–2005年间携带 ctxB class菌株的比例达到97.2%(174/179)；自2006年开始，重新出现了 ctxB ET为主导或二者共存的局面。 rstR 基因的检测表明约62.9%(242/385)的菌株携带 rstR ET，6.8% (26/385)的菌株携带 rstR class，其余菌株中存在不同的 rstR 组合形式，其中，以 rstR ET＋ rstR class的组合最多，占75.7%(75/99)。与 ctxB 相似，不同型别 rstR 的分布呈现时间特异性，1961–1992年期间以携带 rstR ET的菌株占主导(87%，161/185)，1993年以后出现多态性变异，携带其他类型 rstR 如 rstR class， rstR env及不同 rstR 组合的菌株明显增多，与 rstR ET共同存在。96%(25/26)、84%(63/75)和18/18的分别携带 rstR class、 rstR ET＋ rstR class组合和 rstR ET＋ rstR class＋ rstR env组合的菌株均分离于1993年之后。 结论 中国霍乱弧菌菌株中 ctxB 和 rstR 的型别分布有明显的时间特异性， rstR 存在多种组合形式，反映了菌株多样性的遗传和进化特征