人胚肺成纤维细胞衰老过程中线粒体生物学性状变化的研究

目的 研究人胚肺成纤维细胞复制性衰老及过氧化氢诱导的早衰过程中线粒体生物学性状的变化。 方法 将人胚肺成纤维细胞培养至22群体倍增水平（PDL），用400 μmol/L H 2O 2染毒工作液避光染毒1次，每次2 h，染毒于每天同一时间内进行，连续染毒4 d后，为细胞早衰起始组（PSi）；连续染毒4 d后，停止染毒并继续正常培养7 d后为细胞早衰持续组（PSp）；同时基于细胞传代情况，将细胞分为年轻细胞组（22 PDL）、中年细胞组（35 PDL）、复制性衰老细胞组（49 PDL）、PSi和PSp 5个细胞衰老组。分别测定不同衰老组细胞的线粒体分布及相对含量、腺嘌呤核苷三磷酸（ATP）、8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）含量，转录因子（TFAM）、DNA甲基转移酶1（mtDNMT1）mRNA表达水平，DNA拷贝数，TFAM蛋白表达水平和总甲基转移酶（mtDNMTs）活性。 结果 49 PDL组细胞的mtDNA拷贝数、8-OHdG含量、mtDNMT1的mRNA表达水平及mtDNMTs活性均高于22 PDL组（ P 值均 < 0.05）；PSi的8-OHdG含量高于22 PDL组（ P< 0.05）；PSp组细胞的ATP含量、mtDNA拷贝数、TFAM的mRNA和蛋白表达水平以及mtDNMTs活性均高于22 PDL组（ P 值均 < 0.05）。 结论 人胚肺成纤维细胞衰老过程中，复制性衰老与早衰细胞的mtDNA拷贝数和mtDNMTs活性均升高，氧化应激可能参与调控早衰的发生进程