趋化因子融合蛋白SDFKDEL慢病毒载体pLenti6/V5SK的构建和表达

目的构建含趋化因子融合蛋白SDFKDEL的慢病毒载体pLenti6/V5S K，为研究I型人免疫缺陷病毒（HIV1）感染的基因治疗奠定基础。方法应用聚合酶链反应（PCR）技术扩增目的基因片段SDFKDEL，纯化后的PCR产物定向连接入pLenti6/V5D TOPO载体，构建慢病毒载体pLenti6/V5S K，并在293FT细胞中建立慢病毒株，最后转染人宫颈癌HeLa细胞观察SDF1蛋白的表达。结果成功构建了慢病毒载体pLenti6/V5S K，并证实SDF1蛋白可在HeLa细胞系内表达。结论慢病毒载体可介导CXC细胞内趋化因子（CXCintrakine，SDFK）基因高效、稳定转染HeLa细胞，可用于抗HIV1感染的基因治疗