AccQ-Tag柱前衍生反相高效液相色谱法测定谷物及食糜中氨基酸含量

用AccQ-Tag法测定不同谷物及食糜中氨基酸的含量，并优化原料与酸解剂的比例。采用内标法定量，6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯为柱前衍生剂，用反相高效液相色谱仪，2475荧光检测器（激发波长250nm、发射波长395nm），Waters AccQ-Tag Nova-PakTMC18柱（3.9mm×150mm，4μm），柱温37℃，以醋酸钠（pH4.95）缓冲液为流动相A，纯乙腈为流动相B，水为流动相C进行梯度洗脱，进样量为10μL。结果发现，5mg原料的最优酸解剂为500μL；17种氨基酸线性回归方程在25～500μmol/L范围内线性良好（胱氨酸（Cys）浓度在12.5～250μmol/L之间），相关系数r为0.9996～0.9999，测定的平均回收率为97.56%～103.92%（n=3），相对标准偏差为0.31%～2.75%（n=3）。本法快速简便，能够适用于谷物及食糜中氨基酸含量的测定