副溶血性弧菌单克隆抗体的制备及特性鉴定

为制备特异性强的副溶血性弧菌的单克隆抗体，解决单克隆抗体对免疫学检测产品研发的制约，以副溶血性弧菌（Vibrio parahaemolyticus）ATCC 17802标准菌株免疫Balb/c小鼠，经细胞融合、间接酶联免疫吸附测定法筛选，获得稳定分泌抗副溶血性弧菌（ATCC 17802）菌株的单克隆杂交瘤细胞株3F7D7E8C4，通过体内诱生腹水大量制备抗体，用亚类试剂盒测定抗体亚类为IgG1；采用辛酸硫酸铵沉淀法以及亲和层析柱对腹水进行纯化，聚丙烯酰胺凝胶电泳实验鉴定单克隆抗体的纯度。制备得到腹水抗体效价为1∶16 000，纯化后抗体效价为1∶8 000，抗体敏感性IC50达到106 CFU/mL。纯化后的抗体与12 株副溶血性弧菌均能特异性结合，与其他9 种非副溶血性弧菌的食源性致病菌均无交叉反应