橘霉素免疫牛蛙肌肉蛋白柱的制备及其吸附橘霉素作用分析

用橘霉素人工抗原-佐剂免疫牛蛙，研究牛蛙肌肉蛋白质对橘霉素结合能力的大小。将能与橘霉素结合的蛋白质用海藻酸钠制粒。取6.4?mg橘霉素人工抗原免疫牛蛙肌肉蛋白质，使用海藻酸钠质量浓度4?g/100?mL、氯化钙质量浓度5?g/100?mL、戊二醛交联体积分数0.2%、交联时间2?h，制备海藻酸钙包埋蛋白质凝胶微球。取海藻酸钙凝胶微球2?g装填成固相小柱，以2?mL红曲米橘霉素提取液过柱，以20?mL超纯水洗脱杂质，与市售免疫亲和柱色谱图比较，均没有杂质干扰峰。以橘霉素标准液作为上样液，以70%乙腈-三氟乙酸作为橘霉素洗脱液，洗脱剂量为5?mL，回收率为86.7%，柱容量为0.101?μg/g。采用自制的牛蛙免疫蛋白柱和市售免疫亲和柱测得红曲米中橘霉素含量分别为0.037?μg/g和0.043?μg/g