EMA-PCR法快速检测啤酒中腐败短乳杆菌

将叠氮溴乙锭（ethidium bromide monoazide，EMA）与聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）技术相结合，以酒花耐受基因horC为靶基因，用啤酒腐败短乳杆菌基因组DNA作为模板进行扩增。结果发现，在前处理过程中加入EMA，当终质量浓度小于20 μg/mL时，对活的短乳杆菌中靶基因的扩增没有明显抑制作用；而当EMA终质量浓度为1.0 μg/mL时可有效抑制105 CFU/mL短乳杆菌死细胞的扩增。本实验建立的EMA-PCR检测方法的灵敏度为104 活细胞/mL酒液样品。验证实验结果表明，在13 株乳酸菌中，建立的horC特异性EMA-PCR能有效检测到其中的全部5 株啤酒污染菌，同时可区分这5 株菌的活/死细胞混合体系，降低检测过程中的假阳性