发菜胞外多糖硫酸化条件的优化及红外光谱分析

液体培养发菜细胞，发菜细胞经去藻体、浓缩、透析、脱蛋白、醇沉、DEAE-52离子交换柱层析分级、Sephadex-100葡聚糖凝胶柱分级处理得到发菜胞外精多糖。以硫酸根的取代度为指标，在单因素试验的基础上，利用Box-Behnken设计进行响应面试验，建立因素与响应值之间的数学模型，确定适宜的发菜胞外多糖硫酸化条件。结果表明，发菜胞外多糖硫酸化修饰最佳条件为反应温度71 ℃、反应时间3 h、氯磺酸-吡啶体积比1∶7，在此条件下，硫酸化取代度为5.05。红外光谱检测表明，硫酸基团已与多糖分子结合