绞股蓝内生真菌多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

目的：探究绞股蓝内生真菌JY25多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用，为绞股蓝内生真菌多糖的应用提供基础数据。方法：确定4-硝基酚-α-D-吡喃葡萄糖苷（4-N-trophenyl-α-D-glu-copyranoside，PNPG）比色法检测α-葡萄糖苷酶活力的最佳条件，以阿卡波糖为阳性对照，采用优化后的最佳条件测定JY25多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用，并确定抑制类型、计算抑制常数；以Caco-2细胞作为体外产α-葡萄糖苷酶模型，测定JY25多糖的抑制效果。结果：反应时间30 min、反应温度44 ℃、pH 6.8、底物（PNPG）浓度5 mmol/L为PNPG比色法的最佳反应条件。以此优化条件进行比色，当JY25多糖质量浓度为6.15 mg/mL时，对α-葡萄糖苷酶抑制率达到最大（68.21%）；JY25多糖的半数抑制浓度（IC50）为（2.46±0.42） mg/mL，抑制常数Ki为1.15 mg/mL，JY25多糖为竞争性抑制剂。在JY25多糖质量浓度为10.00 mg/mL时，对培养16 d的Caco-2细胞所产α-葡萄糖苷酶的抑制率达到16.48%。结论：体外实验证实JY25多糖具有竞争性抑制α-葡萄糖苷酶的作用