一磷酸腺苷与肌动球蛋白相互作用的荧光光谱研究

目的：采用荧光分光光度法研究了一磷酸腺苷（adenosine 5’-monophosphate，AMP）与肌动球蛋白相互作用的情况。方法：根据分子间的相互作用力与相关热力学参数间的关系，结合AMP与肌动球蛋白相互作用的焓变和熵变，讨论AMP对肌动球蛋白荧光的猝灭机理，测定AMP与肌动球蛋白的猝灭常数、结合常数和作用力类型，考察AMP对肌动球蛋白构象的影响。结果：Western blotting证明了不同浓度AMP对肌动球蛋白解离的促进作用；AMP与肌动球蛋白结合反应中ΔG＜0，ΔH＞0，ΔS＞0，两者之间结合主要通过疏水相互作用，且AMP的存在使得肌动球蛋白的构象发生变化，疏水环境极性降低；荧光光谱分析表明AMP与肌动球蛋白的结合使肌动球蛋白内源荧光发生了有规律的猝灭，298 K和313 K温度条件下AMP与肌动球蛋白的静态猝灭常数分别为8.70×102、4.07×102 L/mol，结合常数KLB分别为9.253×102 L/mol和3.142×102 L/mol。结论：AMP通过疏水相互作用力和肌动球蛋白形成复合物，从而促进肌动球蛋白的解离