青蛤酶解多肽对RAW264.7巨噬细胞的免疫调节作用

研究酶解法制备的青蛤多肽（Cyclina sinensis peptides，CSP）对RAW264.7巨噬细胞的免疫调节作用。以RAW264.7巨噬细胞相对增殖率为指标，选用胃蛋白酶对青蛤肉进行酶解，酶解液经超滤、冷冻干燥后，采用噻唑蓝（methyl thiazolyltetrazolium，MTT）法筛选出增殖活性最高的组分进行免疫调节作用研究。采用MTT细胞增殖实验、倒置显微镜观察、中性红吞噬实验、硝酸根还原酶法及酶联免疫吸附检测法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）测定CSP-5对RAW264.7巨噬细胞的生长与增殖、细胞形态、吞噬能力、一氧化氮（nitric oxide，NO）分泌能力及细胞因子白介素（interleukin，IL）-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）分泌能力的影响；同时还研究了CSP-5对巨噬细胞各周期分布的影响。结果表明，分子质量小于3 kDa的CSP-5对RAW264.7细胞的生长与增殖具有明显的促进作用，且主要作用于G0/G1期，对细胞吞噬能力、NO分泌能力和细胞因子分泌能力的提高具有显著的促进效果；形态学观察结果显示经CSP-5作用后巨噬细胞体积变大且长出较多伪足。由此可知，CSP-5具有激活巨噬细胞增强机体免疫力的潜在作用