麦胚降血糖肽的分离纯化及鉴定

建立麦胚降血糖肽的分离纯化方法及鉴定活性多肽的结构组成。采用胰蛋白酶酶解麦胚蛋白，得到降血糖多肽，并进行降血糖动物实验。超滤获得高活性组分，离子交换吸附实验选择最佳的树脂，并对麦胚降血糖肽进行离子交换吸附分离，SephadexG-25和SephadexG-15分离，再经过反相高效液相色谱（reverse phase-high performance liquid chromatography，RP-HPLC）分离高活性成分。最后采用高效液相色谱-电喷雾-质谱（HPLC-electrospray ionization-mass spectrometry，HPLC-ESI-MS）鉴定活性多肽的结构组成。结果显示酶解麦胚蛋白对α-葡萄糖苷酶的抑制性IC50为10.98?mg/mL，能够缓解糖尿病小鼠的症状。超滤获得分子质量小于5?kDa的高活性组分，IC50为1.60?mg/mL。732型阳离子交换树脂的分离效果最好，2.5%氨水的洗脱率为98.13%，通过动态离子交换吸附分离后，活性显著提高，IC50为0.30?mg/mL。通过SephadexG-25和SephadexG-15分离得到高活性组分，经RP-HPLC分离得到8?个组分（峰），其中1号峰的活性和含量都最高，IC50为0.098?mg/mL。HPLC-ESI-MS结果显示m/z?274.45的丰度比较高，经离子碎片拼接，共有7?种多肽，其中二肽有1?种，三肽有6?种。本研究对于开发具有降血糖功效的新型功能性食品有一定的作用