基于DNA核酸适配体序列的超灵敏比色法检测牛乳中的雌二醇

分别利用最适长度的雌二醇DNA核酸适配体的特异性识别和胶体金聚集前后颜色及吸光度的变化实现雌二醇的定性和定量检测。本研究制备了胶体金，并设计了75-mer、35-mer和22-mer的雌二醇核酸适配体，依据没有核酸适配体保护的胶体金在最适氯化钠浓度条件下聚集，而有核酸适配体保护的胶体金在此浓度条件下不聚集以及雌二醇的核酸适配体与雌二醇特异性结合的特性，实现对雌二醇的超灵敏检测。结果表明，在NaCl浓度30 mmol/L、35-mer核酸适配体质量浓度30 nmol/L条件下，雌二醇质量浓度与胶体金在625 nm和523 nm波长条件下，吸光度的比值（A625 nm/A523 nm）在13.6～54.4 pg/mL的范围内呈良好的线性关系，检测限为2.7 pg/mL。所构建的比色法的特异性、稳定性和重复性均良好。应用该方法对牛乳样品进行检测，雌二醇的最低检测限为13.6 pg/mL，因此可用于奶制品中雌二醇的快速检测