应用多重PCR快速鉴定自然发酵肉制品中6 种葡萄球菌

肉葡萄球菌（Staphylococcus carnosus）、木糖葡萄球菌（S. xylosus）、腐生葡萄球菌（S. saprophyticus）、表皮葡萄球菌（S. epidermidis）、马胃葡萄球菌（S. equorum）和松鼠葡萄球菌（S. sciuri）是发酵肉制品中常见的葡萄球菌，为准确、快速地检测和鉴定这些菌种，建立6?种葡萄球菌的多重聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）方法并进行验证。以上述菌种的gap、rpoB、SodA和SNc为靶基因，设计和筛选菌种特异性引物6?对，优化PCR体系，建立6?种葡萄球菌的多重PCR鉴定方法。实验结果显示多重PCR的基因组DNA检测灵敏度可达到4?pg，活菌检测灵敏度可达到2×102?CFU；采用建立的多重PCR方法对传统肉制品中分离的8?株葡萄球菌进行鉴定，结果与16S rDNA序列分析、生理生化鉴定结果一致。建立的多重PCR方法具有较高的种间特异性，可快速、准确地用于发酵肉制品中肉葡萄球菌、木糖葡萄球菌、表皮葡萄球菌、马胃葡萄球菌、松鼠葡萄球菌和腐生葡萄球菌的检测和鉴定，具有较好的应用前景