双向单因素与田口法优化屎肠球菌产谷氨酸脱羧酶培养基

采用双向单因素试验法及田口法，对屎肠球菌产谷氨酸脱羧酶（glutamate decarboxylase，GAD）的培养基进行了优化。结果表明，在筛选的4 种培养基中，蛋白胨-蔗糖-牛肉膏（peptone-sucrose-beef extract，PSB）培养基最利于屎肠球菌产GAD，但其配方中的CaCl2、K2HPO4和柠檬酸铵对GAD合成不利，蛋白胨、蔗糖、乙酸钠和谷氨酸一钠（monosodium glutamate，MSG）对GAD合成影响极显著（P＜0.01），而牛肉膏对GAD合成影响不显著（P＞0.10）。Minitab软件预测培养基的最优用量组合为蛋白胨15g/L、牛肉膏10g/L、蔗糖12.5g/L、乙酸钠6.0g/L、MSG10g/L、吐温801.0g/L，预测300mL发酵醪产GAD总活力为（399.30±12.51）U。经验证，GAD总活力为（384.26±10.32）U，与预测值没有显著性差异（P＞0.05）。改良的PSB培养基的组分较优化前的PSB培养基显著减少，并更有利于GAD的合成，总酶活提高了45.71%