变形假单胞菌2-酮基葡萄糖酸激酶基因的克隆、表达及生物信息学分析

采用聚合酶链式反应技术，从2-酮基葡萄糖酸工业生产菌株变形假单胞菌JUIM01中克隆2-酮基葡萄糖酸 激酶的全长基因kguK，并在此基础上构建了重组菌株大肠杆菌BL21（DE3）/pET-28a（＋）-kguK。在异丙基-β-D- 硫代半乳糖苷的诱导下，该重组菌株表达了一个特异的分子质量约为36.0 ku融合蛋白，且该蛋白的Western-Blot鉴 定结果显示为阳性。生物信息学分析结果表明，该蛋白是一种由305 个氨基酸残基组成的亲水性蛋白，定位于细胞 质中，存在着与pfkB家族蛋白类似的保守结构域，其二级结构中α-螺旋、延伸链和无规则卷曲所占的比例分别为 35.73%、12.79%和51.48%