利用易错PCR构建酱油酿造用T酵母spt15突变库

为得到酱油酿造优良性状的微生物，对酱油酿造用T酵母进行研究。首先利用易错聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）技术构建spt15（可编码TATA结合蛋白）的突变基因库，然后重组于表达载体YEplac195中，并导入尿嘧啶营养缺陷型菌株W303和WM2中筛选。结果表明：在不同盐质量分数的固体培养基中经筛选获得4?个最佳突变菌株，其具有耐盐优势，在酱油发酵中可产生较高的氨基酸态氮。经PCR产物测序可知，重组质粒中目的基因的序列有碱基的增添、缺失和替换