热稳定酸性β - 葡萄糖苷酶的分离纯化及其酶学性质

耐酸性黑曲霉菌株Aspergillus niger L.的菌丝体破碎液依次经过乙醇沉淀、离子交换层析和凝胶过滤等步骤处理，获得电泳纯的β-葡萄糖苷酶，SDS-PAGE显示其分子质量为125.7kD。β-葡萄糖苷酶水解对硝基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷的最适pH值为3.0～4.0，最适温度为70℃，表观米氏常数(Km)值为2.35mmol/L，表观kcat/Km值为2.99×104L/(mol ·s)；水解京尼平苷、水杨苷的表观kcat/Km值分别是1.26×104、1.37×104L/(mol ·s)；水解活性受Mn2+的显著激活和Fe2+、Zn2+、Cu2+等离子的微弱抑制。该酶活性在pH2.0～8.3保持稳定；酶在65℃时保温60min，残余酶活达到了85%，是一种热稳定酸性β-葡萄糖苷酶