产β-D-半乳糖苷酶马克斯克鲁维酵母的分离鉴定及其产酶特性

从藏灵菇中分离筛选到的一株高产β-D-半乳糖苷酶菌株ZX-5，经ITS DNA序列分析，鉴定为马克斯克鲁维酵母。对产酶培养基的最佳碳源和氮源优化结果为半乳糖2.0%，胰蛋白胨1.0%；产酶优化条件：温度30 ℃，培养基初始pH 6.5，装液量30%，转速100 r/min，接种量2.0%，发酵36 h。粗酶液酶活力为2.60 U/mL；经硫酸铵分级沉淀和DEAE离子交换层析，获得纯化酶的比活力为157.35 U/mg。酶最适反应温度35 ℃，最适pH 6.0，在20～40 ℃和pH 5.0～7.0的范围内酶的稳定性较好；Mn2＋对酶的活性有促进作用。利用菌株ZX-5 β-D-半乳糖苷酶分解乳糖并合成低聚半乳糖（galacto-oligosaccharide，GOS），在35 ℃、乳糖质量浓度60 g/100 mL、酶浓度1.0 U/mL条件下，乳糖水解率达68.34%（50 h），GOS产率达34.70%（40 h），具有潜在的应用前景