高效液相色谱-串联质谱法测定婴幼儿配方奶粉中酪蛋白磷酸肽含量

建立一种同位素稀释-高效液相色谱-串联质谱法定量检测婴幼儿配方奶粉中酪蛋白磷酸肽（casein phosphopeptides，CPPs）含量的方法。经Q Exactive Orbitrap扫描，Uniprot蛋白质数据库初步确定CPPs所含肽段，根据质谱响应以及加标回收率等方法学验证实验进一步筛选确定CPPs的特征肽段。样品经过前处理后，采用ACQUITY UPLC BEH 300 C18色谱柱分离，多反应离子监测模式定量测定其中的CPPs特征肽。根据CPPs原料与CPPs特征肽含量的折算系数，从而确定出样品中CPPs的含量。方法学验证结果表明，所建立的方法在10～150?mg/100?g范围内线性关系良好，相关系数大于0.999。在高、中、低3?水平加标实验中，回收率在96.2%～100.2%之间，日间重复性在5.3%～7.8%之间。方法定量限为1?mg/100?g，可以满足婴幼儿配方奶粉中不同CPPs含量水平的定量要求