实时荧光PCR技术快速检测莲蓉制品中芸豆成分

目的：建立基于实时荧光聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）技术检测莲蓉制品中芸豆成分的方法。方法：以芸豆pvsbe2基因高度保守区域设计特异性引物和探针，通过对莲子及其他富含淀粉类植物DNA进行扩增，以验证方法的特异性；以1?ng/μL的芸豆DNA进行系列稀释，确定此法检测灵敏度；对含有1%芸豆与莲子的混合样品的DNA模板进行10?倍梯度稀释，确定重量检测灵敏度；并应用此方法和PCR方法对市场样品进行了检测，对建立的荧光PCR方法进行验证。结果：该检测方法具有高度特异性，与莲子及其他高淀粉植物无交叉反应；DNA质量浓度的检测灵敏度达到1?pg/μL，重量检测灵敏度可达0.01%。含芸豆成分的莲蓉月饼扩增阳性，检测结果与食品标签相符。结论：本研究建立的实时荧光PCR方法具有特异性强、灵敏度高、快速简便的特点，更适合莲蓉制品中芸豆成分的快速检测