重组大肠杆菌合成光学纯L-苯基乳酸

以巨大芽孢杆菌Z2013513基因组DNA为模板，分别PCR扩增得到L-乳酸脱氢酶基因（ldhL）和葡萄糖脱氢酶基因（gdh），将gdh与ldhL分别连接至表达载体pETDuet，获得共表达质粒pETDuet-ldhL-gdh。经转化和验证获得重组菌大肠杆菌BL21（DE3）/pETDuet-ldhL-gdh。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和比酶活力分析表明重组蛋白L-乳酸脱氢酶和葡萄糖脱氢酶均成功表达且具有酶活力。在37 ℃、200 r/min条件下，经60 min反应，催化底物苯丙酮酸合成24.26 mmol/L L-苯基乳酸。产物L-苯基乳酸光学纯度（＞99%），底物摩尔转化率（59.55%），结果表明此重组体系可用于高效合成高光学纯L-苯基乳酸