小檗碱活化AMPK-eNOS减轻油酸所致人主动脉内皮细胞损伤

目的：考察小檗碱对油酸所致内皮细胞损伤的保护作用，并探究其作用机制。方法：以体外培养人主动 脉内皮细胞系（human aorta endothelial cells，HAEC）为受试对象；分别以油酸、油酸联合小檗碱、油酸联合单 磷酸腺苷活化蛋白激酶（adenosine monophosphate-activated protein kinase，AMPK）激活剂（AICAR）或抑制剂 （Compound C）处理HAEC；采用油红O染色法观察细胞内脂滴合成；采用比色法检测细胞内甘油三酯、总胆 固醇含量，硝酸还原酶法检测NO的水平，2’,7’-二氯荧光黄双乙酸盐探针检测细胞内总活性氧（reactive oxygen species，ROS）水平，Western Blotting检测细胞总AMPK、内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase， eNOS）及其磷酸化（p-AMPK、p-eNOS）水平。结果：油酸可浓度依赖性地抑制细胞增殖，小檗碱组各项指标 较正常对照组无显著性差异，油酸联合小檗碱组的细胞活性较油酸组明显好转（P＜0.01）。与正常对照组比较， 油酸组的脂质浸润程度明显，油酸在不同浓度下使内皮细胞的脂质含量呈剂量依赖性增加，加入小檗碱可明显减 少这种脂质堆积。油酸组的NO水平较正常对照组明显减少，小檗碱能显著抑制油酸所致的内皮NO水平的减少， 并且减少由于油酸所致的ROS水平的升高；油酸抑制了AMPK的活化，使p-AMPK和p-eNOS的蛋白水平明显降低 （P＜0.01）；小檗碱可明显逆转油酸所致AMPK和eNOS磷酸化水平下降，Compound C可拮抗其作用。结论：小檗 碱可减轻油酸所致血管内皮细胞损伤，或与其活化AMPK/eNOS信号相关