纤维素载体固定化β-葡萄糖苷酶及其在大豆异黄酮水解中的应用

建立纤维素载体固定化β-葡萄糖苷酶系统，用于黑豆浆中大豆异黄酮去糖基化反应，并对该催化系统进行了可行性评价。结果表明，在40?cm3纤维素颗粒上可结合超过40?mg?β-葡萄糖苷酶，并且能有效将4-硝基苯-β-D-葡糖苷酸水解成对硝基苯酚，其反应最适温度为50?℃。经动力学测试后可得其米氏常数Km值为（1.38±0.20）mmol/L。将该固定化酶系统用于黑豆浆中大豆异黄酮去糖基化，通过高效液相色谱检测其转化效率，表明该系统可以在30?min内利用40?cm3含酶载体将50?mL黑豆浆中的异黄酮全部转化为去糖基化形式。该固定化酶催化系统连续化催化稳定性实验表明，在经过15?次反应以及15?d之后，该固定化酶系统仍然可维持其60%的催化活性