菠萝蜜过氧化物酶活性部位的研究

以菠萝蜜果肉过氧化物酶（peroxidase，POD）为研究对象，用丁二酮、碳化二亚胺（N-ethyl-N’-3-dimethylaminopropyl carbodiimide，EDC）、N-乙酰咪唑（N-acetylimidazole，NAI）、β-巯基乙醇（β-mercaptoethanol，MT）、对-氯汞苯甲酸（parachloro-mercuri-benzoate，pCMB）和焦碳酸二乙酯（diethylpyrocarbonate，DEPC）对POD进行化学修饰，研究酶活性必需基团。结果表明，丁二酮、EDC和NAI对酶活力无显著影响，说明精氨酸、羧基和酪氨酸与酶活力无关；pCMB、DEPC和β-巯基乙醇强烈抑制酶活性，说明半胱氨酸和组氨酸是酶活性的必需基团，二硫键对酶活性有重要贡献。动力学分析和底物保护实验表明，DEPC为POD的竞争性抑制剂，组氨酸位于酶活中心