C-5固醇去饱和酶ERG3对酿酒酵母耐盐性的影响

为阐明酿酒酵母固醇与耐盐特性的关系，构建麦角固醇合成关键基因ERG3敲除菌株Bs-1；平板验证发现，Bs-1在60 g/L NaCl-酵母浸出粉胨葡萄糖（yeast extract peptone dextrose，YPD）平板上菌落生长被抑制，在80 g/L NaCl-YPD平板上完全不能生长；运用气相色谱-质谱联用检测菌株中固醇的种类和含量，发现Bs-1不能合成麦角固醇，却合成了5,6-二氢麦角固醇。此外，分析Bs-1和野生菌株BY4741的代谢发现，在60 g/L NaCl-YPD中， Bs-1的最大OD600 nm为5.56±0.30，比BY4741降低了45%；Bs-1的最高乙醇产量为（4.20±0.00）g/L，比BY4741降低了35%；在盐胁迫条件下，Bs-1与BY4741相比会产生大量胞外甘油，但细胞对甘油的保留能力却减弱。结果表明酵母中固醇种类的变化影响了细胞代谢特性和细胞膜的流动性，造成细胞胞内甘油外排增加，导致细胞耐盐性降低