食品中荧光假单胞菌PCR检测体系的建立和评价

建立用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction，PCR)检测食品中荧光假单胞菌的方法。分别针对16～23S rRNA基因间隔区序列、gyrB基因以及通过生物信息学方法发掘到的4个种特异性基因设计6对检测引物，通过初步特异性实验，筛选出一对种特异性最佳的引物。最终建立以gyrB基因为检测靶点的PCR扩增体系，并对体系进行系统评价。结果表明：该方法可特异检测荧光假单胞菌的存在，纯DNA检测灵敏度为14.9fg/μL (2～3拷贝/μL)，纯培养物检测灵敏度为2.8×102CFU/mL。豆奶样品经15h充分增菌可提高检测灵敏度至0.28CFU/25g