高产L-乳酸米根霉的原生质体制备与再生条件研究

为建立原生质体融合法选育高产L-乳酸米根霉(Rhizopus oryzae)菌株，对米根霉菌株原生质体制备及再生条件进行研究。考察酶种类、酶质量浓度、时间、温度、pH值、渗透压、预处理等因素对原生质体制得量及再生率的影响，获得原生质体制备及其再生的优良条件：不添加甘氨酸，渗透压稳定剂为0.6mol/L的NaCl缓冲液，按1.5mg/mL组合酶质量浓度，蜗牛酶、纤维素酶和溶壁酶质量浓度配比为1:1:1进行混合，35℃、pH6、酶解2h，可获得原生质体制得量最大为2.74×106个/mL，再生率最高为6.8%