siRNA沉默细胞外信号调节激酶1/2基因协同甲亢宁胶囊对大鼠甲状腺细胞-5细胞增殖的影响

目的 通过甲亢宁胶囊（以下简称“甲亢宁”）协同siRNA干扰大鼠甲状腺细胞-5（fisher rat thyroid cell line-5，FRTL-5）中细胞外信号调节激酶（ERK）1/2基因，观察并探讨甲亢宁对FRTL-5细胞RNA干扰ERK1/2基因表达及对FRTL-5细胞增殖的影响。方法 将生长状态良好的FRTL-5细胞分为空白组、阴性对照组、甲亢宁组、siRNA组、甲亢宁协同组。利用siRNA沉默及甲亢宁协同干扰FRTL-5细胞的ERK1/2基因，RT-PCR检测ERK1/2 mRNA表达，Western blot检测ERK1/2、p-ERK1/2蛋白表达，CCK8法检测细胞增殖。结果 RT-PCR检测结果显示，空白组和阴性对照组ERK1/2的mRNA表达无明显差异（P＞0.05）；与空白组比较，siRNA组和甲亢宁组FRTL-5细胞ERK1/2 mRNA表达明显下降（P＜0.01）；与空白组、阴性对照组比较，甲亢宁协同组ERK1/2 mRNA表达明显下降（P＜0.01）；Western blott检测结果显示，与空白组、阴性对照组比较，甲亢宁组、siRNA组、甲亢宁协同组p-ERK1/2、ERK1/2蛋白表达相对量明显下降（P＜0.01）。转染24、48 h后，CCK8法检测结果显示，甲亢宁组、siRNA组、甲亢宁协同组细胞增殖受抑制，与空白组、阴性对照组比较差异有统计学意义（P＜0.01）。结论 甲亢宁对ERK1/2磷酸化起阻断作用，ERK1/2基因被沉默后，对甲状腺细胞增殖有抑制作用，甲亢宁可协同ERK1/2-siRNA抑制FRTL-5细胞增殖