身痛逐瘀汤对人髓核细胞模型PI3K/Akt信号通路Bad、Caspase-9、GSK-3β表达的影响

目的 观察身痛逐瘀汤对人髓核细胞模型PI3K/Akt信号通路凋亡蛋白Bad、Caspase-9、GSK-3β表达的影响，探讨其可能的作用机制。方法 将人髓核细胞分为6组，分离培养、鉴定及传代后，取第3代细胞进行实验。人髓核细胞加入身痛逐瘀汤药物血清，置于医用恒温静水压压力罐中干预，分别于0.3、1、3 MPa压力下作用2、4、6 h，应用倒置相差显微镜观察人髓核细胞加压前后形态及生长状况，应用透射电子显微镜观察人髓核细胞超微结构，流式细胞术检测人髓核细胞凋亡，采用凝胶电泳迁移法检验人髓核细胞PI3K/Akt信号通路标志蛋白p-Akt的表达，Western blot检测人髓核细胞Bad、Caspase-9、GSK-3β蛋白的表达。结果 同一压力下及作用时间，中药组人髓核细胞形态、超微结构和生长状况较压力组明显变好，其中0.3、1 MPa压力差异显著（P＜0.05）；与中药组比较，压力组人髓核细胞凋亡率显著增加（P＜0.05）；凝胶电泳迁移显示，人髓核细胞在0.3、1、3 MPa压力下中药组p-Akt表达明显高于压力组（P＜0.05）；Western blot结果显示，中药组人髓核细胞Bad、Caspase-9、GSK-3β蛋白表达较压力组明显降低（P＜0.05）。结论 身痛逐瘀汤能有效延缓髓核细胞退变，增加细胞活性及减少细胞凋亡，其机制可能与激活PI3K/Akt通路抑制Bad、Caspase-9、GSK-3β蛋白的表达相关