特异性抑制环氧合酶-2表达的siRNA筛选

目的 筛选有效抑制环氧合酶-2(COX-2)表达的小干扰RNA(siRNA)序列，并观察其对细胞中COX-2表达的抑制作用。方法 设计针对COX-2的3对(siRNA24，siRNA954，siRNA1553)及一条FAM荧光标记的阴性对照siRNA(称为HK)。在Lipofectamine2000介导下转染人胃癌细胞系SGC-7901。同时采用RT-PCR法和Western blot方法检测细胞中COX-2含量，以β-actin蛋白做内参照。结果 当Lipofectamine2000浓度在50 μmol?L-1时能实现最大转染效果。与其他各组相比，转染了siRNA954的人胃癌细胞中，编码COX-2 mRNA的含量明显减少(P<0.01)。结论 成功设计了针对COX-2的siRNA，并从中筛选出siRNA954，能够有效抑制人胃癌细胞COX-2表达，为肿瘤治疗及其临床应用奠定了基础