HL60-IL6法在注射用胶原酶和尿激酶热原检测中的应用研究

目的 探讨HL60-IL6单核细胞活化反应法在注射用胶原酶和尿激酶热原检测中的应用。方法 参照中国药典2015年版通则1193，确定注射用胶原酶和尿激酶最小有效稀释浓度。通过细胞增殖抑制试验、热原干扰试验和白介素-6（interleukin-6，IL-6）干扰试验探讨对HL60细胞生长，对热原和IL-6测定无影响的供试品浓度，进而确定适用于注射用胶原酶和尿激酶体外热原测定的HL60-IL6方法。用该方法对2批注射用胶原酶、19批注射用尿激酶供试品进行热原测定。结果 注射用胶原酶最小有效稀释浓度为0.04 U?mL-1，当浓度≤ 60 U?mL-1时对HL60细胞生长无影响，浓度≤ 6 U?mL-1时对IL-6和热原测定无影响。注射用尿激酶最小有效稀释浓度为100 U?mL-1，当浓度≤ 1 000 U?mL-1时对HL60细胞生长无影响，浓度≤ 500 U?mL-1时对IL-6和热原测定无影响。因此，适合HL60-IL6单核细胞活化反应法的注射用胶原酶和尿激酶浓度分别为6，500U?mL-1。用该方法对供试品进行热原测定，结果均未检出热原。结论 HL60-IL6方法适用于注射用胶原酶和尿激酶热原测定