桑黄多糖对人TLR4信号通路的激活作用研究

目的 观察桑黄多糖（polysaccharide from Phellinus igniarius，PPI）对人Toll-样受体4（Toll like receptor 4，TLR4）通路的激活作用及作用特点。方法 采用转染了人TLR4基因、分泌型胚胎碱性磷酸酶报告基因的HEK-BlueTM hTLR4细胞模型，快速评价PPI对TLR4通路的激活作用，并用PMA诱导的THP-1细胞模型观察药物对TLR4通路作用的特点；MTT法检测细胞活性；ELISA法检测细胞因子分泌量；Real time PCR检测细胞mRNA表达水平。结果 PPI作用24 h不影响细胞活性，但能剂量依赖性地增加HEK-BlueTM hTLR4细胞分泌型胚胎碱性磷酸酶的表达，并使THP-1细胞TLR4通路相关细胞因子TNF-α，IP-10分泌量增加。TLR4受体阻断剂TAK-242能显著降低PPI诱导的细胞因子分泌量（P<0.01）。Real-time PCR结果显示PPI既可以增加MyD88通路TNF-α、IL-6、IL-12、IL-1β、COX-2等细胞因子的mRNA表达，又可以增加TRIF通路IP-10、IFN-β等细胞因子的mRNA表达。结论 PPI对人TLR4受体具有直接激活作用，能同时激活TLR4下游MyD88和TRIF 2条分支，对TLR4分支通路的激活没有选择性