shRNA沉默STAT3基因对结肠癌细胞增殖及顺铂敏感性的影响

目的 构建携带信号转导与转录激活子3(STAT3)基因的短发夹RNA(shRNA)真核表达载体，观察pGPU6/GFP/Neo- STAT3重组质粒对HCT116细胞顺铂化疗敏感性的影响。方法 设计并构建稳定转录shRNA STAT3的质粒，采用脂质体法转染结肠癌HCT116细胞，Western blot法检测转染后STAT3蛋白表达变化，MTT法检测细胞增殖变化。重组质粒联合顺铂作用于HCT116细胞后，MTT法检测细胞存活率。结果 成功构建了pGPU6/GFP/Neo-STAT3重组质粒，测序证实重组质粒构建正确。重组质粒转染HCT116细胞后，细胞增殖明显受抑制，STAT3蛋白表达降低。重组质粒联合顺铂治疗后，细胞增殖活性显著降低。结论 shRNA STAT3重组质粒能明显降低HCT116细胞中STAT3蛋白的表达，抑制细胞增殖，提高结肠癌细胞对顺铂的敏感性