HPLC测定人血清中甲氨蝶呤浓度

目的 建立高效液相色谱法测定人血清中甲氨蝶呤(methotrexate，MTX)浓度的方法。方法 以茶碱为内标，色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)，流动相为磷酸盐缓冲液(pH 6.6)-甲醇(82∶18)，检测波长为MTX 306 nm和茶碱254 nm，流速为1.0 mL?min-1，柱温为30 ℃。结果 MTX浓度分别在0.03~1.65 μmol?L-1(r=0.999 9)和1.65~66.08 μmol?L-1(r=0.995 8)内线性关系良好，平均方法回收率97.6%。平均萃取回收率68.5%，日内、日间RSD均<5%，血清最低检测浓度为0.03 μmol?L-1。结论 该方法灵敏、准确，线性范围宽，适用于临床甲氨蝶呤的血药浓度监测